اسدالهی, ابرا هیم and اسدي, دکتر اسداله and زهري, دكتر صابر and برزگر, دكتر ابوالفضل (2011) Investigation on preparation and characterization of protein drug loaded nanoparticles and their biological effects. Masters thesis, University of Mohaghegh Ardabili.
![]() |
Text
file nahayi for print asadollahi tez1 - Copy.pdf Download (1MB) |
Abstract
Improvements in biotechnological industries lead to production of many novel protein and peptide drugs which potentially applicable in treatment of many diseases like cancer, disease which are resulted from defect in lysosomal and digestive enzymes, thrombolytic disease and diabetes. The use of these therapeutic agents is restricted by instability and low biological half-life, solubility and cell membrane impermeability. By the use of nanoparticles overcoming these limitations is possible and engulfment of therapeutic agents by nanoparticles result in 1-drug molecules be unrecognizable by immune system, 2-increase in the size of therapeutic agents and slower remove by renal filtration, 3-increase in apparent solubility and decrease in precipitation of poor soluble drugs in blood vessels, 4- effective intracellular delivery and endosomal escape of therapeutic molecules. Other advantages which are result from the use of drug delivery systems are possibility of passive and active targeting. In this work, triblock copolymers were synthesized and after confirmation of their synthesis by FTIR and H-NMR spectroscopy, biocompatibility tests were performed. Electron microscopy studies verified formation of micelles by copolymers and their CMC were determined. Also fluorescence microscopy studies showed that these nanoparticles were able to enter the cells. Loading of peptide drug agents (iturin, surfactin and gramicidin) on nanoparticles were confirmed by CD, fluorescence, FTIR, and electron microscopy studies. HeLa cancerous cell line was treated with iturin in free form and then was loaded on nanoparticles. In addition, LNCaP cancerous cell line was treated by surfactin and gramicidin loaded nanoparticles and their effects on cells were measured and compared to free surfactin and gramicidin effects. Results showed that these therapeutic agents when loaded on nanoparticles have more effect on cells in compared to their free form (in the case of surfactin and gramicidin the observed changes in toxicity is significant). According to the obtained results, we suggest that BDP16 and BDP18 have good biocompatibility and essential features for formulation and use as effective peptide drugs nanocarrier.
Item Type: | Thesis (Masters) | ||||||
---|---|---|---|---|---|---|---|
Persian Title: | تهيه و بررسي استقرار عوامل دارویی پروتئینی بر روی نانوحامل های مختلف و تاثير زيستي آن¬ها | ||||||
Persian Abstract: | رشد صنعت بیوتکنولوژی منجر به تولید شمار زیادی از عوامل دارویی پروتئینی و پپتیدی نوینی گردیده است که در درمان بسیاری بیماری¬ها نظیر سرطان¬، بیماری¬های حاصل از نقص آنزیم¬های لیزوزومی و آنزیم¬های گوارشی، بیماری¬های ترومبولیتیک، دیابت و ...کاربرد دارند. استفاده از این عوامل دارویی با محدودیت¬هایی نظیر ناپایداری و نیمه عمر بیولوژیکی پایین آن¬ها، حلالیت¬پذیری و نفوذناپذیری غشاء سلولی مواجه می¬باشد. با استفاده از نانوناقل¬ها امکان غلبه بر بسیاری از این محدودیت¬ها وجود دارد و دربرگیری عوامل دارویی توسط ناقل¬ها 1-باعث عدم شناسایی دارو توسط سیستم ایمنی، 2-افزایش اندازه¬ی عوامل دارویی و ممانعت از حذف سریع توسط فیلتراسیون کلیوی، 3-افزایش حلالیت ظاهری و عدم رسوب دارو در عروق خونی و 4-رهش درون سیتوپلاسمی کارآمد و فرار اندوزومی مولکول¬های درمانی می¬شوند. از دیگر مزایای استفاده از سیستم¬های دارو رسانی می¬توان به هدف¬دار کردن فعال و غیر فعال اشاره کرد. در این تحقیق کوپلیمرهای سه قطعه¬ای PLGA-PEG-PLGA (18BDP) و PLA-PEG-PLA (16BDP، و26BDP) سنتز شدند و پس از تأیید سنتز آن¬ها توسط طیف¬سنجی¬های FTIR و NMR، تست¬های مربوط به زیست¬سازگاری انجام شدند. مطالعات میکروسکوپ الکترونی توانایی این پلیمرها را در تشکیل میسل تأیید کرد و CMC آن¬ها تعیین گردید. همچنین مطالعات میکروسکوپ فلورسانس نشان داد این نانوذرات قادر به ورود به درون سلول می¬باشند. تأیید بارگیری عوامل دارویی پپتیدی (ایتورین، سورفاکتین، گرامیسیدین) روی نانوذرات توسط مطالعات CD، فلورسانس، FTIR و میکروسکوپ الکترونی انجام شد. سلول-های سرطانی رده¬ی هلا با لیپوپپتید ایتورین در حالت آزاد و حالتی که روی نانوذرات بارگیری شده بود تیمار شدند و سلول-های سرطانی رده¬ی LNCaP نیز توسط نانوذرات بارگیری شده با سورفاکتین و گرامیسیدین تیمار شدند و میزان اثر آن¬ها بر سلول¬ها در مقایسه با سورفاکتین و گرامیسیدین آزاد ارزیابی گردید. نتایج حاصل از این آزمون نشان دادند که این عوامل دارویی در حالت بارگیری شده روی نانوذرات در مقایسه با فرم آزاد خود تاثیر بیشتری دارند(در مورد سورفاکتین و گرامیسیدین تغییر تأثیرات قابل توجه می¬باشند). با توجه به نتایج بدست آمده می¬توان گفت که نانوذرات حاصل از دو کوپلیمر18BDP و 16BDP دارای زیست¬سازگاری مطلوب می¬باشند و ویژگی¬های لازم برای فرمولاسیون و استفاده بعنوان نانوناقل¬های کارآمد عوامل دارویی پپتیدی را دارند. | ||||||
Supervisor: |
|
||||||
Advisor: |
|
||||||
Subjects: | Faculty of Basic Sciences > Department of Biology Divisions > Faculty of Basic Sciences > Department of Biology |
||||||
Divisions: | Subjects > Faculty of Basic Sciences > Department of Biology Faculty of Basic Sciences > Department of Biology |
||||||
Date Deposited: | 09 Jul 2019 08:14 | ||||||
Last Modified: | 09 Jul 2019 08:14 | ||||||
URI: | http://repository.uma.ac.ir/id/eprint/7608 |
Actions (login required)
![]() |
View Item |