Preparation and characterization of polypeptide containing nanoparticles and its biological effects

نزهت, زهرا and اسدي, دکتر اسداله and زهري, دكتر صابر and برزگر, دكتر ابوالفضل (2010) Preparation and characterization of polypeptide containing nanoparticles and its biological effects. Masters thesis, University of Mohaghegh Ardabili.

[img] Text
First pages2.pdf

Download (1MB)
Official URL:


There are many approaches to peptide and protein drugs delivery. One of these methods is conjugating peptides with water-soluble polymers. In this presentation, PLGA-PEG-PLGA triblock copolymer as a polypeptide carrier after preparation, was confirmed by FTIR spectrum. The size of produced nanoparticles by this copolymes was between 400-500nm. For investigation of biocompatibility of this copolymer MTT assay and hemolysis assaye were used. The obtained results show high biocompatibility of copolymer. The polypeptide, that was selected for peptide delivery was surfactin. Surfactin, a non-ribosomal heptalipopeptide, is produced by Bacillus subtilis strains. Recent studies show that it possesses numerous biological activities such as antitumor and anticancer activities. In this presentation different properties of surfactin such as its hemolytic activity, second structure, micellization ability and interaction with receptor (by Autodock software) were investigated. For sustained delivery of peptide studies, surfactin was conjugated non-covalently with polymeric nanoperticles and then surfactin-loaded nanoparticles were confirmed by FTIR spectrum. Effect of copolymer on secondary structure of surfactin was investigated by far-UV CD spectrum. The sizes of polymeric nanoparticles, surfactin micelles and surfactin-loaded nanoparticles were measured by SEM. For investigation of biological activity of surfactin, polymeric nanoparticles and surfactin-loaded nanoparticles, HeLa cell line was treated by different concentration of them. Cell viability was estimated by MTT assay. MTT assay results exhibited that surfactin-loaded nanoparticles were more effective in arresting cell growth as compared to that shown by free surfactin. According to the results, it is concluded that PEG-PLGA-PLGA nanoparticles are capable of delivering surfactin over a prolonged period achieving a sustained delivery of surfactin, thus make it a potential candidate for cancer therapy.

Item Type: Thesis (Masters)
Persian Title: تهيه و بررسي خصوصيات نانوذرات حاوي پلي¬پپتيد و تاثير زيستي آن
Persian Abstract: در اين بررسي کوپليمر سه قطعه¬اي، پس از سنتز از طريق طيف سنجي FTIRمورد تاييد قرار گرفت. بررسي نانوذرات حاصل از اين کوپليمر با استفاده از ميکروسکوپ الکتروني نگاره حاکي از تشکيل ميسل¬هاي کاملا کروي در ابعاد 400 تا 500 نانومتر بود. به منظور بررسي زيست سازگاري پليمر، از آزمون هموليز و MTT استفاده گرديد نتايج به دست آمده نشان داد که اين کوپليمر سيتوتوکسيسيتي کمي داشته و در غلظت¬هاي به کار رفته به منظور رهش دارو (کمتر از 2 ميلي گرم در ميلي ليتر) سيتوتوکسيسيتي بسيار ناچيزي را از خود نشان مي¬دهد. در اين تحقيق به منظور بررسي رهش دارو از پلي پپتيد سورفاکتين استفاده گرديد ابتدا خصوصيات سورفاکتين مانند سيتوتوکسيسيتي، اثر هموليتيکي، توانايي تشکيل ميسل (توسط SEM)، بررسي ساختار دوم توسط Far-UV CD و ميانکنش آن با رسپتور داخل سلولي با استفاده از نرم افزار Aoutodock مورد بررسي قرار گرفت. سپس براي لود کردن سورفاکتين بر روي نانوذرات پليمري (نسبت 1 به 20) در بافرPBS تحت امواج فراصوت قرار گرفت. لود شدن سورفاکتين بر روي نانوذرات پليمري توسط FTIR، Far-UV CD و نيز تشکيل ميسل¬هاي مختلط سورفاکتين -پليمر در ابعاد 20 تا 100 نانومتر توسط ميکروسکوپ الکتروني نگاره مورد تاييد قرار گرفت. نتايج حاصل از Far-UV CD و FTIRدر مورد بررسي اثر پليمر روي ساختارهاي دوم سورفاکتين با هم مطابقت داشت. سورفاکتين لود شده بر روي نانوذرات، در غلظت¬هاي مختلف (غلظت¬هاي به کار رفته در مورد سورفاکتين آزاد) در سه بازه¬ي زماني 16، 24 و 48 ساعت بر روي سلول¬هاي سرطاني هلا تاثير داده شده و با استفاده از آزمون MTT مقادير IC50 آن تعيين گرديد. مقايسه¬ي نتايج حاصل با نتايج به دست آمده از آزمون MTT سورفاکتين آزاد، نشان داد که سورفاکتين لود شده بر روي نانوذرات تاثير بيشتري را در توقف رشد سلولي نسبت به سورفاکتين آزاد داشت که اين اختلاف در بازه¬ي زماني 48 ساعت چشمگيرتر بود. بنابراين مقايسه¬ي نتايج نشان دهنده کاهش اندازه¬ي نانوذرات (ميسل-هاي مختلف)و افزايش ورود سورفاکتين به داخل سلول و رهش آهسته¬ي سورفاکتين در داخل سلول از نانوذرات پليمري است.
اسدي, دکتر اسدالهUNSPECIFIED
زهري, دكتر صابرUNSPECIFIED
برزگر, دكتر ابوالفضلUNSPECIFIED
Subjects: Faculty of Basic Sciences > Department of Biology
Divisions > Faculty of Basic Sciences > Department of Biology
Divisions: Subjects > Faculty of Basic Sciences > Department of Biology
Faculty of Basic Sciences > Department of Biology
Date Deposited: 10 Jul 2019 06:36
Last Modified: 10 Jul 2019 06:36

Actions (login required)

View Item View Item